怎么看犬瘟假阳性?
目前市场上对于犬瘟的检测,绝大多数为间接ELISA方法,其原理为:当样本中存在抗体,样本中的抗体和包被板上的抗原结合形成复合物,加入的酶标二抗与抗体结合,生成酶标二抗-抗体-抗原-包被板复合物,加入呈色底物产生颜色。样本中的抗体越多,形成的复合物越多,呈色后颜色越深,吸光值越高。故用酶标仪在450nm波长下测量吸光值大小判断样本抗体强弱。
影响犬瘟抗体假阳性的因素包括:
血清或血浆样本在-20℃保存时间较长,或者反复冻融5次以上;
操作过程R型管未离心或离心转速不足5分钟,使R型管上清浑浊;
样本漏加,未加盖子,造成交叉污染;
检测时温度过高,超过30℃,造成样本和试剂失活;
实验时封闭不完全,导致交叉污染,造成假阳性;
洗涤不彻底,导致残留酶标物漂移至下一孔,造成假阳性。
综上所述,我们在日常检测时一定要按照操作规程进行操作,在低温状态下保存样本防止反复冻融,R型管一定要垂直离心后加盖子上清用于测定,严格按照实验要求进行检测,确保测定结果的准确性。